ABSTRACT
A resistência às drogas quimioterapêuticas é um dos maiores problemas no tratamentode câncer. Um tipo de resistência às drogas, resistência a múltiplas drogas (MOR), está associado com a superexpressão de uma glicoproteína de membrana denominada glicoproteína P(Pgp), a qual usa energia de ATP para bombear drogas anticancerígenas para fora das células. A resistência MDR pode ser revertida por uma série de agentes, incluindo-se agentes de diferenciação celular, mas o mecanismo exato de ação. Ainda não foi estabelecido. O propósito deste estudo foi comparar a linhagem celular resistente a múltiplas drogas, originada da linhagem celular K562 e selecionada por sua resistência à vincristina (LUCENA-K562), com outras duas linhagens celulares sesíveis: a linhagem parental K562 (eritroleucemia) e HCT 116 (adenocarcinoma de cólon), a fim de analisar a relação entre a expressão de glicoproteína P e a modulação da diferenciação celular. A resistência às drogas e a modulação da diferenciação celular foram medidas usando-se testes in vitro. O aspecto básico foi a medida de mudanças na expressão de Pgp, do antígeno carcinoembriônico (CEA) (imunocitoquímica), conteúdo de hemoglobina (coloração de benzidina) e afluxo de rodamina 123 ( análises de citometria de fluxo e de microscopia de fluorecência). O efeito de TPA (12-Otetradecanoilforbol 13-acetato), RA ácido retinóico), DIMSO (dimetilsulfóxido), OUA (ouabaína), HMBA (hexametileno bisacetamida) e 5-fluorouracil (5-FU) foi testado. A exposição à 5-FU produziu modificações morfológicas, aumento de células benzidina positiva e atividade Pgp em linhagens eritroleucêumicas. TPA induziu modificações morfológicas, indução de CEA e atividade Pgp em linhagens de adenocarcinoma, enquanto as drogas RA, DIMSO, OUA e HMBA não induziram os mesmos efeitos. O tratamento in vivo com moduladores de dierenciação celular requer cautela, visto poder levar à indução de resistência celular como verificada em nossos resultados.
Clinical resistance to chemotherapeutic drugs is a major problem in the treatment of cancer. One type of drug resistance - multidrug resistance (MDR) is associated with the over-expression of a membrane glycoprotein termed P-glycoprotein (Pgp), which uses the energy of ATP to pump anti-cancer drugs out of multidrug-resistant cell. MDR resistance can be reversed by a number of agents, including differentiation agents, but the exact mechanism of action have not yet been established. The aim of this study was to compare a multidrug resistant cell line, derived from the cell line K562 and selected as resistant to vincristine (LUCENA-K562), with two other sensitive cell lines: the parental K562 (erythroleukemia) and HCT 116 (colon adenocarcinoma) in order to analyze the relationship between Pglycoprotein expression and cell differentiation. The drug resistance and the modulation of cell differentiation were measured using in vitro tests. The basic features were the changes in measurement of Pgp and carcinoembryonic antigen (CEA) expression by immunocytochemistry, hemoglobin contents (benzidine staining) and rhodamine-123 eftlux (flow cytometric analysis and fluorescence microscopy). The effect of TPA (12-O-tetradecanoilphorbol 13-acetato), RA (retinoic acid), DMSQ (dimethyl sulfoxide), OUA (ouabain), 5-FU (5-fluorouracil) and HMBA (hexamethylene-bis-acetamide) was tested on the three cell lines. The 5-FU exposure produced morphological changes, increase of benzidine-positive cells and Pgp activity on erithroleukemia cell lines. TPA produced morphological changes, CEA induction and Pgp activity on adenocarcinoma cell line, while the other drugs (RA, DMSO, OUA and HMBA) did not induce the same effects. The clinical treatment with modulators of cell differentiation requires caution, as it might lead to the induction of cell resistance as verified on our results.